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黑光燈在黃曲霉素檢測中的應用

作者:紫外光源事業部時間:2019-12-10 12:03:50瀏覽5439 次

信息摘要:

黃曲霉毒素是由黃曲霉和寄生曲霉產生的,對人和動物都具有很高的毒性和致癌性。黃曲霉毒素大量食用會導致死亡,或導致人類和動物的慢性疾病。在發達,這些有嚴格的篩查程序,這主要是一個經濟問題-使用傳統化學測試篩查玉米既昂貴又費時。天氣是黃曲霉毒素發展的主要因素。在高溫和干旱的年份中,真菌的生長趨于普遍。雖然通過良好的文化習慣(例如灌溉,使用殺真菌劑和更改播種日期)可以在一定程度上抵消發展,但是在嚴重干旱期間,這些做法的效果較差。此外,它們對于玉米生產者而言往往是昂貴的。

黃曲霉毒素為何重要?

已經發現它們可以以極低的濃度對某些實驗動物致癌,例如大鼠,雪貂,鴨,鱒魚,狗,火雞,牛和豬。毒素阻止了細胞內蛋白質的合成以及動員脂肪的能力。因此,肝臟的生長和變化不佳,達到1 ppm或更高的水平。受影響的大多數動物會變得沮喪,毛發差,貧血,長期進食而遭受慢性損害并經常發生抽搐。黃曲霉毒素是由黃曲霉和寄生曲霉產生的,對人和動物都具有很高的毒性和致癌性。

黃曲霉毒素為什么會發生?

如果將曲霉曲霉菌儲存在潮濕的地方,其溫度允許霉菌生長并隨后形成黃曲霉毒素,則幾乎所有谷物,水果和蔬菜都可能發生黃曲霉。它在現場不是很常見,但基本上是在存儲中形成的。在玉米的情況下,可以在高度污染的玉米粒附近發現不含毒素的玉米粒,大概是被黃曲霉感染了,因此可能涉及濕度和溫度以外的因素,例如對玉米粒的物理損害或谷物成熟度。已經嘗試使昆蟲活性(玉米耳蟲)與隨后被黃曲霉感染受損的玉米相關聯。這些都不成功,并且沒有建立關系。然而,最近的昆蟲損害與收獲前玉米中黃曲霉毒素的存在有關。沒有黃曲霉毒素污染的樣品來自收獲前的耳朵逃脫了昆蟲活動的田地。黃曲霉極有可能入侵被昆蟲破壞的收獲前玉米。
黃曲霉毒素大量食用會導致死亡,或導致人類和動物的慢性疾病。在發達,這些有嚴格的篩查程序,這主要是一個經濟問題-使用傳統化學測試篩查玉米既昂貴又費時。
天氣是黃曲霉毒素發展的主要因素。在高溫和干旱的年份中,真菌的生長趨于普遍。雖然通過良好的文化習慣(例如灌溉,使用殺真菌劑和更改播種日期)可以在一定程度上抵消發展,但是在嚴重干旱期間,這些做法的效果較差。此外,它們對于玉米生產者而言往往是昂貴的。

黃曲霉毒素的更大吸收量約為360nm,摩爾吸收率約為20,000:B毒素以藍色熒光(425nm)命名,G毒素以綠藍色熒光(450nm)命名。B 1毒素是最常見的,由B 2毒素流過,而G毒素相當罕見。G毒素的熒光敏感性比B毒素的熒光敏感性高10倍以上。G毒素的更低可檢測水平約為100 pgram,B毒素的更低可檢測水平為1 ngram。

在BLAK-RAY LUYOR-3410高強度黑光燈下檢查玉米是否有破裂和損壞的籽粒特征性的亮黃綠色(BGY)熒光。測試需要5分鐘或更短的時間。如果觀察到熒光,則可能存在黃曲霉毒素,但不一定以明顯或可檢測的水平存在。玉米和其他食物中的某些物質在長波紫外線照射下會發出熒光,但與黃曲霉毒素無關。許多其他真菌,例如黑曲霉,各種青霉菌,白曲霉和其他不產生黃曲霉毒素的菌種,都可以產生無害于熒光的代謝產物,因此,盡管存在條件表明具有以下條件,但熒光并不能作為表明有毒霉菌存在的具體標志。對有毒的霉菌的生長是有利的。

此外,從玉米中分離出的黃曲霉顯示出廣譜的黃曲霉毒素產量,從無可檢測的產量到高水平(> 100 ppm)。造成這種情況的一個可能的原因是,自然毒素污染的玉米中的熒光不穩定,并且在連續暴露于可見光或紫外線的情況下在4至6周內消失,盡管該毒素并未消失。因此必須采集新鮮的樣品。

黃曲霉毒素污染的玉米

黃曲霉毒素如何檢測?

霉菌毒素污染是飼料行業中的一個重要問題,霉菌毒素自然發生于某些商品飼料中,在合適的條件下霉菌迅速生長并產生霉菌毒素。霉菌毒素B1是具有強烈毒性的化合物,所以應盡量避免霉菌毒素的污染。霉菌毒素的鑒定方法有許多種,從借藉“黑光燈”做簡單的肉眼觀察,到運用高壓液相色譜儀進行的復雜分析。  
黑光燈——本測試法利用黑暗視野中的LUYOR-3410高強度黑光燈長波紫外線進行檢測, 若見到明亮的綠黃色熒光(BGYF),則表示受黃曲霉毒素污染。玉米貯藏過程中盡管可能有黃曲霉素殘留,但由于熒光減弱,所以會呈現假性結果。當所取樣品是具代表性的,所有的谷粒是被碾碎的,且觀 測是由一名有經驗的操作者來實施的時候,那么,“黑光”檢測就會非常準確。
血清學方法——業已發明了多種快速檢測霉菌毒素的測試盒。 這些檢測依靠簡單的提取程序,讓提取物與已處理過的表面進行反應,以引起變色反應。這些檢測方法的優點是廉價、使用簡便并且相當準確。這些方法大部分是作定性分析,顯示陽性或陰性結果。  
色譜法——這類檢測是定量分析法,依靠實驗室技術,比較復雜。高壓液相色譜(HPLC)和薄層層析(TLC)法是最常用的方法。它們代表標準的方法,人們常以HPLC  和TLC法作基準來評估其它方法。

黃曲霉毒素污染的玉米

黃曲霉毒素如何排毒和預防?

一旦玉米和其他產品受到污染,實際上沒有任何切實可行的方法可以完全去除毒素而不改變產品。例如,加熱不會破壞毒素;然而,通過用氨溶液處理受黃曲霉毒素B 1污染的玉米已經實現了一定程度的解毒,但這在商業上是不可行的。認為B 1通過二氫呋喃呋喃環系統不可逆地結合到蛋白質部分上,并且該分子的半縮醛部分可以導致酚二醛衍生物,該衍生物能夠通過靜電或氫與蛋白質和產物氨基酸上的氨基反應粘接。問題本質上在于確定黃曲霉菌如何以及何時侵入商品,霉菌形成黃曲霉毒素的過程涉及哪些因素以及如何防止霉菌的生長。這至少可以通過以下方法實現:

控制環境
使用化學抗真菌劑
利用自然抵抗力因子

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關于黃曲霉毒素的檢測的標準:

1 GB/T 36858-2018  飼料中黃曲霉毒素B1的測定 液相色譜法
2 GB/T 30955-2014  飼料中黃曲霉毒素B1、B2、G1、G2的測定 免疫親和柱凈化-液相色譜法
3 GB/T 17480-2008  飼料中黃曲霉毒素B1的測定 酶聯免疫吸附法
4 GB/T 18980-2003  乳和乳粉中黃曲霉毒素M1的測定 免疫親和層析凈化液相色譜法和熒光光度法 


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