GFP綠色熒光蛋白的性能和GFP用于分子標記
GFP是green fluorescent protein的簡寫。是由下村修等人在1962年在一種學(xué)名Aequorea victoria的水母中發(fā)現(xiàn)。GFP其基因所產(chǎn)生的蛋白質(zhì)，在藍色波長范圍的光線激發(fā)下，會發(fā)出綠色熒光。

GFP熒光蛋白的性能：
GFP熒光極其穩(wěn)定，在激發(fā)光照射下，GFP抗光漂白（Photobleaching）能力比熒光素（fluorescein）強，特別在450～490nm藍光波長下更穩(wěn)定。GFP需要在氧化狀態(tài)下產(chǎn)生熒光，強還原劑能使GFP轉(zhuǎn)變?yōu)榉菬晒庑问剑坏┲匦卤┞对诳諝饣蜓鯕庵校珿FP熒光便立即得到恢復(fù)。而一些弱還原劑并不影響GFP熒光。
中度氧化劑對GFP熒光影響也不大，如生物材料的固定、脫水劑戊二酸或甲醛等。GFP融合蛋白的熒光靈敏度遠比熒光素標記的熒光抗體高，抗光漂白能力強，因此更適用于定量測定與分析。但因為GFP不是酶，熒光信號沒有酶學(xué)放大效果，因此GFP靈敏度可能低于某些酶類報告蛋白。由于GFP熒光是生物細胞的自主功能，熒光的產(chǎn)生不需要任何外源反應(yīng)底物，因此GFP作為一種廣泛應(yīng)用的活體報告蛋白，其作用是任何其它酶類報告蛋白無法比擬的。

GFP綠色熒光蛋白用于分子標記
作為一種新型的報告基因，GFP已在生物學(xué)的許多研究領(lǐng)域得到應(yīng)用。利用綠色熒光蛋白獨特的發(fā)光機制，可將GFP作為蛋白質(zhì)標簽（protein tagging），即利用DNA重組技術(shù)，將目的基因與GFP基因構(gòu)成融合基因，轉(zhuǎn)染合適的細胞進行表達，然后借助熒光顯微鏡便可對標記的蛋白質(zhì)進行細胞內(nèi)活體觀察。由于GFP相對較小，只有238個氨基酸，將其與其他蛋白融合后不影響自身的發(fā)光功能，利用GFP的這一特性已經(jīng)加深了我們對細胞內(nèi)一些過程的了解，如細胞分裂、染色體復(fù)制和分裂，發(fā)育和信號轉(zhuǎn)導(dǎo)等。
1996年，Ehrdardt等人報道了利用GFP的特性研究細胞分化蛋白FtsZ的定位。研究顯示FtsZ在細胞分裂位點形成了一個環(huán)狀物，且至少有9種蛋白在細胞分裂中起重要作用，盡管對這些蛋白功能仍然不是很清楚，但是利用GFP融合蛋白已經(jīng)搞清楚了它們聚合的順序以及在蛋白定位中的一些特征。利用GFP來檢測目標蛋白的定位已為我們提供了一種對細胞內(nèi)的一些基本的生理過程進行更詳盡觀察的新方法。

GFP蛋白觀察常見問題：
1.動物植物里面表達GFP如何觀察和拍照？
首先要選擇光線比較暗的環(huán)境，佩戴路陽LUV-90P觀察眼罩，采用美國路陽熒光蛋白觀察鏡LUYOR-3260RB照射要觀察的植株，GFP表達位置即可清晰呈現(xiàn)。
2.觀察到的GFP表達位置如何拍照？
要拍照植物GFP表達的位置，首先要有一臺單反相機，安裝美國路陽LUV-520植物拍照濾鏡，美國路陽LUV-520濾鏡是62mm，如果您的單反相機鏡頭不是62mm，可在市場上購買濾鏡安裝轉(zhuǎn)換卡，也可直接找美國路陽中國服務(wù)中心免費索取，用LUYOR-3260RB熒光蛋白觀察鏡照射植物，用裝有LUV-520濾鏡的單反相機直接拍照就行了，切記要關(guān)閉照相機閃光功能。
3.紅色熒光蛋白如何觀察和拍照？
首先要選擇光線比較暗的環(huán)境，佩戴路陽LUV-50觀察眼罩，采用美國路陽便攜式熒光蛋白觀察鏡LUYOR-3260GR照射要觀察的植株，GFP表達位置即可清晰呈現(xiàn)。
4. 用LUYOR-3260RB便攜式熒光蛋白觀察鏡需要把植物葉片采下來觀察嗎？
LUYOR-3260RB便攜式熒光蛋白觀察鏡內(nèi)置有充電電池，即開即用，可以直接帶入到試驗田里面觀察， 無需采摘葉片，如果試驗田光線太亮，需要做隔光處理。
5. LUV-520拍照濾鏡可以用于其他廠家的激發(fā)光源嗎？
凡是能激發(fā)GFP熒光的熒光蛋白觀察鏡， LUV-520拍照濾鏡均能夠滿足，可以單獨購買LUV-520拍照濾鏡。
6.  365nm、450nm、488nm 用哪個波段更好？
GFP蛋白和egfp蛋白用這幾個波段都能激發(fā)出熒光，365nm激發(fā)的比較弱，488nm激發(fā)的熒光最強，但488nm的激發(fā)波長太接近發(fā)射波長520nm，激發(fā)光和發(fā)射光距離太近對觀察眼鏡要求太高，觀察眼鏡很難把發(fā)射光隔離掉，會嚴重干擾發(fā)射的熒光。所以用450nm的激發(fā)光是最理想的。
7.  365nm的紫外光源照射植物葉片為什么是紅色和黃色？
365nm的紫外光源照射植物葉片，葉片的葉綠素在紫外線作用下會發(fā)紅光，GFP發(fā)出的是綠色的熒光，紅色和綠色混在一起，會變成黃色，所有，用紫外光源照射葉片上黃色部位有可能就是GFP表達的位置。
8.  為什么觀察眼鏡和拍照濾鏡價格這么貴？
因為這種眼鏡和濾鏡的鏡片對波段的截止要求特別高，不允有任何激發(fā)光通過，鏡片表面經(jīng)過了60多層涂層處理，制造工藝特別復(fù)雜。
9.  觀察眼鏡和拍照濾鏡如何保養(yǎng)？
觀察眼鏡和拍照濾鏡的鏡片經(jīng)過了60多層涂層處理，不用時請放置好，表面有灰塵請用柔軟的鏡頭布蘸中性洗滌劑擦洗.
10. LUYOR-3260RB熒光蛋白觀察鏡主要有哪些應(yīng)用？
1.檢測轉(zhuǎn)綠色熒光蛋白（GFP）基因、紅色熒光蛋白（DsRed）基因植物：水稻、小麥、玉米、大豆、棉花、擬南芥等；
2.檢測轉(zhuǎn)GFP、DsRed基因動物：小鼠、兔子、猴子等；
3.檢測轉(zhuǎn)GFP、DsRed基因微生物：細菌、真菌、酵母等；
4.檢測GFP、DsRed基因組織特異性表達
11.在哪里可以買到美國路陽的便攜式熒光蛋白觀察鏡？
美國路陽在上海設(shè)立有中國客戶服務(wù)中心，提供路陽產(chǎn)品的銷售維修服務(wù)。上海、北京、鄭州均可免費上門演示，美國路陽對中國地區(qū)的客戶提供3年免費維修服務(wù)，中國地區(qū)免費咨詢電話：4006-254-365，也可掃描下方微信二維碼添加微信咨詢：