洋蔥表皮細胞瞬時轉化

實驗材料準備
選取新鮮、生長狀況良好的洋蔥，在超凈工作臺上除去外面的1-2層鱗片，用無菌解剖刀十字形切開洋蔥球莖，取球莖內部較新鮮肥厚的鱗片（第4-7層最為理想），在內表皮（凹面）用刀片劃出面積約2cm × 2cm的小方塊，用無菌鑷子將小方塊撕下，貼近葉肉的一面朝下，平鋪于含有MS培養基的培養皿內，28℃弱光下預培養4 h，然后利用基因槍法進行目的基因的轉化。

金粉準備
(1) 稱取60 mg金粉放入1.5 mL離心管，加入1 mL無水乙醇，渦旋振蕩2 min；
(2) 冰上放置5 min后，10,000 r/min離心1 min，去上清；
(3) 按步驟1，2重復清洗金粉2次；
(4) 加入1 mL無菌水，渦旋振蕩2 min，冰上放置5 min后，10,000 r/min離心1 min，去上清；
(5) 重復步驟4兩次；
(6) 加入1 mL無菌水，在渦旋振蕩條件下，按50 μL每份分裝到1.5 mL離心管備用。

質粒DNA包埋金粉
(1) 取50 μL已分裝好的金粉懸浮液，在渦旋振蕩條件下依次加入5 μL質粒DNA（1 μg/μL），50 μL 2.5 mol/L CaCl2，20 μL 0.1 mol/L亞精胺；
(2) 渦旋振蕩3 min，室溫下，10,000 r/min離心10 sec，盡可能棄去上清；
(3) 加入50 μL無水乙醇，可進行4次基因槍轟擊。

基因槍轟擊操作
射擊參數：轟擊微粒運行距離9 cm，壓力1350 psi，真空度20 mmHg。將轟擊結束后的材料，繼續在28℃弱光下培養8 h，然后使用LUYOR-3415RG便攜式熒光蛋白激發光源照射，佩戴LUV-30A觀察眼鏡觀察EGFP基因的表達或使用激光共聚焦顯微鏡在488 nm波長激發下觀察EGFP基因的表達。